百迪人胚腎細(xì)胞293T 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶
- 品名： 百迪人胚腎細(xì)胞293T 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶
- 品牌： 百迪生物
- 型號： C5004
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品概述 來源 胚腎 形態(tài) 貼壁、上皮樣 培養(yǎng) 高糖DMEM+10%FBS 37℃ 5%CO2 傳代 0.25%胰蛋白酶消化1-2min，比例1:2-1:3 產(chǎn)品簡介 人胚腎細(xì)胞293T (HEK293T) 衍生于HEK293細(xì)胞，攜帶有SV40T- 抗原基因，具有較高的轉(zhuǎn)染效率和蛋白質(zhì)表達(dá)能力，適用于逆轉(zhuǎn)錄病毒生產(chǎn)、基因轉(zhuǎn)染、蛋白表達(dá)和藥物篩選等實驗。 收貨指南 1. T25細(xì)胞瓶到貨后處理方案：
（1） 驗貨：培養(yǎng)瓶上標(biāo)簽、培養(yǎng)瓶完好性以及瓶口是否有漏液；
（2） 處置：75%酒精對培養(yǎng)瓶消毒后，放入37℃，5% CO2的培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)2-4小時后，進(jìn)行顯微觀察、拍照，作為售后維權(quán)依據(jù)；
（3） 注意：貼壁細(xì)胞在運輸過程中發(fā)生細(xì)胞脫落，這是正?，F(xiàn)象，靜置后可恢復(fù)貼壁。
2. 凍存管到貨后處理方案：
（1） 驗貨：包裝的標(biāo)簽、包裝內(nèi)是否有干冰、凍存管完好性；
（2） 處置：盡快復(fù)蘇（見培養(yǎng)方法）或程序降溫后轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 培養(yǎng)方法 1.培養(yǎng)基：
89%高糖 DMEM 培養(yǎng)基；10% 胎牛血清 (FBS); 1%青霉素-鏈霉素（P/S）。
2.復(fù)蘇：
(1)解凍：用鑷子將凍存管浸于37 ℃水浴;反復(fù)搖晃，迅速完成解凍；
(2)離心：噴灑75%酒精消毒后，在無菌環(huán)境下，打開凍存瓶，用移液器將細(xì)胞連同凍存液移至含1 mL完全培養(yǎng)基的10 mL離心管中，室溫1200 rpm離心3-5 min，細(xì)胞沉于離心管底部；
(3)培養(yǎng)：將上清液輕輕棄去，加2 mL完全培養(yǎng)基，輕柔懸起細(xì)胞，然后將所有細(xì)胞懸液移至含有3 mL完全培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶中，于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
(4)觀察：每日觀察細(xì)胞生長狀態(tài) (培養(yǎng)基顏色、細(xì)胞貼壁情況、形態(tài)與密度等)并拍照。
3.傳代：
細(xì)胞密度達(dá)80%-90%開始傳代
(1) 清洗：無菌下吸出培養(yǎng)基，用37 ℃預(yù)熱的PBS清洗一次;
(2)消化：加1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶令其浸潤所有細(xì)胞，室溫(或37 ℃)消化，顯微鏡下觀察到細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回超凈臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1 mL完全培養(yǎng)基終止消化；
(3)離心：用移液器輕柔吹勻后然后將懸液轉(zhuǎn)移至10 mL離心管中，在1200 rpm離心3-5 min；
(4)培養(yǎng)：無菌下棄上清液，加1 mL完全培養(yǎng)基懸起細(xì)胞并移至T25培養(yǎng)瓶中;按1：2-1：3比例添加完全培養(yǎng)基，用移液器輕柔吹勻后，分裝至培養(yǎng)瓶中，于37°C，5% CO2,培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 生物安全等級 1請在無菌環(huán)境中操作，避免污染；為了保護(hù)細(xì)胞的穩(wěn)定性，細(xì)胞傳代次數(shù)不宜過多；為了結(jié)果的可靠性，實驗前請確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好；嚴(yán)格遵守生物安全操作規(guī)程。 免責(zé)聲明 本產(chǎn)品僅用于科研目的，不得用于臨床診斷、治療等用途。用戶應(yīng)遵循國家和地區(qū)的法律法規(guī)，自行承擔(dān)使用本產(chǎn)品所產(chǎn)生的一切風(fēng)險和責(zé)任。請在使用前仔細(xì)閱讀本說明書，并按照指導(dǎo)操作。如有任何疑問或需要進(jìn)一步信息，請與我們聯(lián)系。 產(chǎn)品詳情 人胚腎細(xì)胞293T (HEK293T) 衍生于HEK293細(xì)胞，攜帶有SV40T- 抗原基因，具有較高的轉(zhuǎn)染效率和蛋白質(zhì)表達(dá)能力，適用于逆轉(zhuǎn)錄病毒生產(chǎn)、基因轉(zhuǎn)染、蛋白表達(dá)和藥物篩選等實驗。
