百迪MSC無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基500ml
- 品名： 百迪MSC無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基500ml
- 型號(hào)： S101-500
- 產(chǎn)品詳情
- 規(guī)格參數(shù)
產(chǎn)品信息
| 適用范圍 | 試劑 |
|---|---|
| 使用方法 | UC-MSC 原代培養(yǎng)（組織塊法） 1. 配制 MSC 完全培養(yǎng)基，MSC 無血清培養(yǎng)基：MSC 培養(yǎng)基添加劑：青鏈雙抗=500ml：25ml：5ml，4℃保存，2 周內(nèi)使用。 2. 無菌條件下取新鮮臍帶，用 DPBS 漂洗凈血跡。一般臍帶取得環(huán)境非無菌，可以稍微用75%酒精潤洗。 3. 置于 10 cm 培養(yǎng)皿中，剪成 1~2cm 臍段，剔除血管，用 DPBS 洗凈血跡，再剪成 1mm3 組織塊。 4. 用無菌滴管吸取少量細(xì)小組織塊均勻散布在 6 孔板 2 個(gè)孔中。 5. 37℃，5%CO 培養(yǎng)箱孵育 30min，以使組織塊粘貼在培養(yǎng)皿壁上。 5. 向每孔滴加 0.8 ml 完全培養(yǎng)基（注意沿孔壁小心滴加，勿使沖動(dòng)組織塊）。 6. 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱孵育過夜，次日（D1）每孔再補(bǔ)加 1 ml 完全培養(yǎng)基。 7. 37℃，5% CO2 繼續(xù)培養(yǎng)，5 天（D6）后半量換液（此時(shí)一般看不到細(xì)胞，但最快 3 天就可看到細(xì)胞從組織邊沿爬出）。 8. 再過 5 天后半量換液（此時(shí)一般會(huì)有細(xì)胞爬出，但最晚可到 14 天會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞從組織邊沿爬出）。 9. 每 2 天換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng) 2~4 天，待細(xì)胞密度達(dá)到約 80%后傳代培養(yǎng)。 注意事項(xiàng)：組織塊培養(yǎng)的關(guān)鍵是要保障組織塊始終貼壁，換液動(dòng)作要盡可能輕微，避免沖動(dòng)組織塊。培養(yǎng)基加量不能太多，以免組織塊漂浮。 UC-MSC 傳代培養(yǎng)與凍存 1. 待細(xì)胞融和度達(dá)到約 80%后進(jìn)行傳代（細(xì)胞不能太密集，否則容易分化），吸棄孔板中的培養(yǎng)基，每孔加適量 DPBS 輕輕沖洗 1 次。 2. 根據(jù)培養(yǎng)皿適量加入重組胰酶-EDTA，在 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱作用 3~5 min（可輕拍培養(yǎng)瓶幫助細(xì)胞脫落）。 3. 顯微鏡下觀察細(xì)胞完全脫落后，使用 5ml MSC 無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基，1000 rpm 離心 3~5 min。 4. 謹(jǐn)慎吸出上清，細(xì)胞團(tuán)塊用適當(dāng)體積的完全培養(yǎng)基懸浮后，混勻細(xì)胞懸液。 5. 按照所需的比例進(jìn)行傳代或按照 7000-8000cells/cm2 的細(xì)胞密度將細(xì)胞接種至培養(yǎng)器皿中，放入 37℃，5% CO2 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。 6. 每 2-3 天更換一次培養(yǎng)基，待細(xì)胞融合度達(dá)到 80%左右時(shí)，參照上述操作步驟 1~5 做細(xì)胞傳代；或者參照操作步驟 1~3 收獲細(xì)胞凍存。 7. 細(xì)胞凍存：將細(xì)胞團(tuán)塊懸浮于適量無血清干細(xì)胞專用凍存液（無酚紅）中，裝入凍存管，2~8℃冰箱放置 30 min，-80℃冰箱放置 24 h，轉(zhuǎn)入液氮罐凍存。 |
| 注意事項(xiàng) | 1. MSC 無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加劑在室溫或 2-8℃解凍，避免反復(fù)凍融。 2. 本產(chǎn)品啟封前若有少量細(xì)小的凝聚物，是培養(yǎng)基成分的析出，屬于正常現(xiàn)象，可輕輕混勻后使用； 3. 使用本產(chǎn)品時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照無菌操作的規(guī)程進(jìn)行操作； |
| 聲明 | 僅用于科研使用，不能用于臨床診斷和治療。 |
| 保存條件 | 4℃ |
產(chǎn)品詳情
BDBIO 間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）培養(yǎng)基是一款無血清、無異源成分的培養(yǎng)基，用于多種來源(即骨髓、脂肪組織、臍帶組織和牙髓) 間充質(zhì)干細(xì)胞的生長和擴(kuò)增，支持 MSC 的長期生長，同時(shí)保持其自我更新和多譜系分化潛力。
暫無內(nèi)容...
